使用SRM1649b空氣顆粒性誘導(dǎo)皮膚老化研究結(jié)果:
1、SRM1649b 浸出液抑制 HaCaT 和 NHDF 細胞的增殖:CCK8 實驗結(jié)果顯示與 對照組相比當(dāng) SRM1649b 孵育時間逐漸延長的時候,HaCaT 和 NHDF 細胞的增殖能 力減弱。SRM 1649b的濃度越高,HaCaT 和 NHDF 細胞的增殖能力越低;
2、SRM1649b浸出液促進 HaCaT 和 NHDF 細胞凋亡:流式細胞術(shù)(FCM)檢測 結(jié)果顯示:與對照組相比,SRM1649b 浸出液處理后抑制 HaCaT 和 NHDF 細胞周期的 進程,使細胞發(fā)生 G1/S 期阻滯,調(diào)控細胞周期 G1 到 S 期的關(guān)鍵蛋白 Cyclin A和 Skp2 蛋白表達下調(diào)。與對照組相比,SRM1649b 浸出液處理后,HaCaT 和 NHDF 細胞的 凋亡率明顯的增加;
3、SRM1649b浸出液上調(diào)細胞內(nèi) MMP1 蛋白表達:實時熒光定量 PCR結(jié)果顯示: 與對照組相比,HaCaT 和 NHDF 細胞中基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP1,MMP3 和 MMP9 的 mRNA 表達上調(diào)。ELISA 法檢測顯示基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP1 的蛋白表達上調(diào);
4、SRM1649b浸出液導(dǎo)致芳香族化合物受體 AhR 核轉(zhuǎn)位:細胞免疫熒光結(jié)果顯 示:SRM1649b 浸出液刺激后,HaCaT 和 NHDF 細胞內(nèi)芳香族化合物受體 AhR 進入 細胞核分布明顯;
5、SRM1649b 浸出液激活 ERK/MAPK 信號通路:Western-blot 檢測結(jié)果顯示: 與對照組相比 SRM1649b 浸出液處理組 ERK/MAPK 信號通路中的相關(guān)蛋白 p-ERK1/2,p-c-Jun 磷酸化水平上調(diào)。其下游靶基因 CYP1A1,MMP1 的 mRNA 表達 水平上調(diào);
6、研究發(fā)現(xiàn)加入 AhR 受體拮抗劑后抑制SRM1649b對 HaCaT 和 NHDF 中 MMP1,CYP1A1 等基因的表達上調(diào)。
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